[发明专利]一种基于酵母菌实时在线分析大气颗粒物毒性的方法有效
| 申请号： | 201511032569.7 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105548114B | 公开（公告）日： | 2018-07-13 |
| 发明（设计）人： | 要茂盛;魏恺;罗春雄;邱明昊;张荣飞 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京万象新悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11360 | 代理人： | 李稚婷 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于酵母菌实时在线分析大气颗粒物毒性的方法。首先筛选出对外界不同刺激有灵敏应激响应的酵母菌不同功能蛋白，并获得所述功能蛋白被绿色荧光蛋白标记的酵母菌；将其菌液通入微流控芯片中作为生物传感器；然后采集大气颗粒物，实时混入酵母菌的液体培养基中，通过蠕动泵通入微流控芯片中，动态观测微流控芯片中不同区域不同功能蛋白标记的活体酵母菌绿色荧光的强度变化；通过定量分析荧光的强度随时间变化数值，评估大气颗粒物的毒性。该方法集大气颗粒物采样、多通道微流控技术和单活体酵母菌传感器为一体，实现对大气颗粒物毒性的实时、原位、全组分的分析，为评价空气污染健康效应机制研究提供了在分子水平全方位分析方法。 | ||
| 搜索关键词： | 酵母菌 大气颗粒物 功能蛋白 实时在线分析 活体 流控 绿色荧光蛋白标记 强度随时间变化 芯片 生物传感器 微流控芯片 液体培养基 定量分析 动态观测 分子水平 机制研究 健康效应 绿色荧光 强度变化 多通道 蠕动泵 微流控 空气污染 传感器 采样 混入 菌液 应激 荧光 灵敏 分析 采集 筛选 刺激 响应 评估 | ||
【主权项】：
1.一种实时在线分析大气颗粒物毒性的方法，包括如下步骤：1)筛选出对外界不同刺激有灵敏应激响应的酵母菌不同功能蛋白，并获得所述功能蛋白被绿色荧光蛋白标记的不同酵母菌；2)将步骤1)获得的不同功能蛋白标记的酵母菌的菌液分别通入微流控芯片的不同通道中作为生物传感器；3)采集大气颗粒物，并将其混入酵母菌的液体培养基中，实时通入微流控芯片中，观测微流控芯片中不同功能蛋白标记的活体酵母菌绿色荧光的强度变化；4)对荧光的强度随时间变化数值进行记录和定量分析，在蛋白分子水平实时评估大气颗粒物的毒性。
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