[发明专利]哑铃结构寡核苷酸、包含其的核酸扩增用引物及利用该引物的核酸扩增方法

摘要

本发明涉及哑铃结构寡核苷酸(dumbbell structure oligonucleotide,DSO)、包含其的核酸扩增用引物及利用该引物的核酸扩增方法，更具体而言，涉及一种在进行聚合酶链反应中，能够在每个第一周期的与模板结合之前排除非特异性扩增产物的利用了哑铃结构寡核苷酸的多重基因扩增及单核苷酸多态性分析方法。本发明在聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)时，利用哑铃结构寡核苷酸(dumbbell structure oligonucleotide,DSO)，在常温下抑制非目的扩增产物，因而通过减少非特异扩增产物，能够高效提高敏感度和特异度，改进基因扩增方法，所述哑铃结构寡核苷酸通过附加任意碱基序列和3`‑末端模板依赖型特异碱基序列以及使该两种碱基序列连接的普适碱基对而生成，并且将所述哑铃结构寡核苷酸的5'‑末端寡核苷酸和3`‑末端寡核苷酸设计成在每个第一周期的与模板结合之前互补结合。

主权项

一种以如下通式表示的哑铃结构寡核苷酸，通式：5'‑Ap‑Bq‑Cr‑3'其中，所述A代表包含具有与所述3'‑末端的连续碱基序列互补的碱基序列的核甘酸的5'‑低Tm特异性部位，所述B代表包含具有普适碱基的核甘酸的切割部位，所述C代表包含具有与模板核酸的特定连续碱基序列互补的碱基序列的核甘酸的3'‑高Tm特异性部位，所述p、q及r代表核甘酸数目。