[发明专利]使用化学连接和半抗原转移的邻近测定法

摘要

用于原位检测两个目标靶标的邻近的方法，其特征在于与具有可检测部分的可切割桥组分缀合的抗体和与不可切割桥组分缀合的抗体。所述桥组分各自具有适于在特定条件下且当靶标密切邻近时形成共价键的化学连接基团。在共价键形成之后，所述可切割桥组分可以从抗体切割，有效地将所述可检测部分转移至所述不可切割桥组分。所述可检测部分的检测表明靶标密切邻近。所述方法与显色和荧光检测系统相容。所述方法可用于进行其中在同一载片上检测一个或多于一个邻近事件的测定。

主权项

1.确定样品中的第一靶标和第二靶标邻近的方法，所述方法包括：使第一修饰的结合分子与所述第一靶标结合以形成第一复合物，其中，所述第一修饰的结合分子包含可切割桥组分，所述可切割桥组分包含切割位点、可检测部分和第一化学连接基团，所述切割位点比所述可检测部分和所述第一化学连接基团更邻近于所述第一修饰的结合分子，所述第一化学连接基团在所述可切割桥组分的末端，所述第一化学连接基团在生理条件下是稳定的；使第二修饰的结合分子与所述第二靶标结合以形成第二复合物，所述第二修饰的结合分子包含不可切割桥组分，所述不可切割桥组分包含第二化学连接基团，所述第二化学连接基团在所述不可切割桥组分的末端，所述第二化学连接基团在生理条件下是稳定的；将所述第一化学连接基团与所述第二化学连接基团共价连接，以形成其中所述第一靶标和所述第二靶标邻近的共价键合的单元；切割所述可切割桥组分的切割位点，使得所述共价键合的单元与所述第二修饰的结合分子、而非第一修饰的结合分子结合；去除不是共价键合的单元的一部分的可切割桥组分；和使所述可检测部分可见，其中在所述可检测部分可见的情况下，所述第一靶标和所述第二靶标邻近。