[发明专利]一种利用微通道低温冻存大鼠胰岛细胞的方法有效
申请号: | 201610022353.0 | 申请日: | 2016-01-13 |
公开(公告)号: | CN105454221B | 公开(公告)日: | 2018-01-23 |
发明(设计)人: | 陈万煜;张丽;李鹏程;陈熹 | 申请(专利权)人: | 武汉理工大学 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司42102 | 代理人: | 王守仁 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明是一种利用微通道低温冻存大鼠胰岛细胞的方法,其利用微通道的受限空间使超分子凝胶的三维结构发生改变,以更好地保护大鼠胰岛细胞,具体是将低分子量的凝胶因子溶于细胞培养基中,待其溶解后制备得到含有凝胶因子的大鼠胰岛细胞悬浮液;再将此悬浮液导入微通道中,并置于3~5℃冰水浴中使其发生凝胶化,随后将冻存保护剂导入微通道中,使之缓慢渗透到细胞中,最后将微通道装置置于程序降温盒中放入‑75~‑85℃冰箱中冻存。本发明为大鼠胰岛细胞的冻存提供了一种新方法,其降低了冻存体系的冰点,减少了大鼠胰岛细胞在冻存过程中受到的冷冻损伤,提高了大鼠胰岛细胞的存活率,并且维持了复温后大鼠胰岛细胞的活性和功能,具有广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 通道 低温 大鼠 胰岛 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种利用微通道低温冻存大鼠胰岛细胞的方法,其特征在于该方法是利用微通道的受限空间使超分子凝胶的三维结构发生改变,以更好地保护大鼠胰岛细胞,具体是:将低分子量的凝胶因子溶于细胞培养基中,待其溶解后制备得到含有一定量凝胶因子的大鼠胰岛细胞悬浮液;然后将此大鼠胰岛细胞悬浮液导入微通道中,并置于3~5℃冰水浴中使其发生凝胶化,随后再将冻存保护剂导入微通道中,使冻存保护剂缓慢渗透到细胞中,并将冻存有大鼠胰岛细胞的微通道装置置于程序降温盒中放入‑75~‑85℃冰箱中冻存;所述的微通道装置由微通道(5)和载玻片(6)组成,微通道管道宽为200~280μm,深度为115~225μm;所述的低分子量凝胶因子为氨基酸类凝胶因子。
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