[发明专利]T-2毒素的检测方法及检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201610041769.7 申请日: 2016-01-21
公开(公告)号: CN105606574B 公开(公告)日: 2018-07-24
发明(设计)人: 夏晓东;冉海宁;杨阳;唐春然 申请(专利权)人: 湖南科技大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 张家界市慧诚商标专利事务所 43209 代理人: 高红旺
地址: 411201 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明涉及一种检测T‑2毒素的方法及试剂盒,该方法包括如下步骤:(A)使T‑2毒素核酸适体与单链信号探针ssDNA杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品接触,当待测样品中有T‑2毒素存在时,杂交链与T‑2毒素反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用外切酶,将双链DNA水解成单核苷酸而清除双链DNA,此时体系中留下ssDNA;(D)在ssDNA诱导下,银离子还原生成近红外荧光银纳米簇;检测体系荧光强度,从而测定待测样品中的T‑2毒素的含量。该方法具有高灵敏度,操作简单,低成本等特点。
搜索关键词: 毒素 检测 方法 试剂盒
【主权项】:
1.一种T‑2毒素的检测方法,其特征是,该方法包括如下步骤:(A)T‑2毒素核酸适体与单链信号探针DNA(ssDNA)杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品作用,当待测样品中有T‑2毒素存在时,杂交链选择性地与T‑2毒素反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)消除杂交链的干扰,利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用外切酶,将双链DNA水解成单核苷酸而除去双链DNA,留下单链信号探针ssDNA;(D)利用T‑2毒素核酸适体‑T‑2毒素结合体不能诱导银离子还原生成近红外荧光银纳米簇,只有单链信号探针ssDNA能够诱导银离子还原成近红外荧光银纳米簇,检测体系的荧光强度,从而测定待测样品中的T‑2毒素的含量;所述T‑2毒素核酸适体为5’‑CAGCTCAGAAGCTTGATCCTGTATATCAAGCATCGCGTGTTTACACATGCGAGAGGTGAAGACTCGC‑3’;所述的单链信号探针ssDNA为5’‑CCCCCCACACCCGATCCCCCCCGCGAGTCTTCACC‑3’。
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