[发明专利]赭曲霉毒素A的快速检测方法在审
申请号: | 201610043741.7 | 申请日: | 2016-01-24 |
公开(公告)号: | CN105543376A | 公开(公告)日: | 2016-05-04 |
发明(设计)人: | 曾云龙;刘婷;黄昊文;徐合意;邓克勤;易守军;唐春然 | 申请(专利权)人: | 湖南科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/115 |
代理公司: | 张家界市慧诚商标专利事务所 43209 | 代理人: | 高红旺 |
地址: | 411201 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明涉及一种赭曲霉毒素A的快速检测方法,该方法包括如下步骤:(A)使赭曲霉毒素A核酸适体(Apt)与单链信号探针DNA(ssDNA)杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品接触,当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时,杂交链与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用外切酶选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸,而单链信号探针ssDNA不水解而保留下来;(D)在ssDNA诱导下,铜离子还原生成近红外荧光铜纳米粒子;检测体系荧光强度,从而测定待测样品中的赭曲霉毒素A的含量。该方法具有高灵敏度,操作简单,低成本等特点。 | ||
搜索关键词: | 曲霉 毒素 快速 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种赭曲霉毒素A的快速检测方法,其特征是,该方法包括如下步骤:(A)使赭曲霉毒素A核酸适体(Apt)和可与赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链信号探针DNA(ssDNA)杂交,形成杂交链;(B)使该杂交链与待测样品作用,当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时,杂交链选择性地与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针ssDNA;(C)为了消除杂交链的干扰,利用DNA扩增,使杂交链成双链DNA,然后用外切酶,选择性地将双链DNA水解成单核苷酸,留下单链信号探针ssDNA;(D)利用赭曲霉毒素A核酸适体‑赭曲霉毒素A结合体不能诱导铜离子还原生成近红外荧光的铜纳米粒子,只有单链信号探针ssDNA能够诱导铜离子还原成近红外荧光铜纳米粒子,检测体系的荧光强度,从而测定待测样品中的赭曲霉毒素A的含量。
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