[发明专利]抗乙肝e抗原的绿色荧光抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201610064812.1 | 申请日： | 2016-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN105524167A | 公开（公告）日： | 2016-04-27 |
| 发明（设计）人： | 张贯京;陈兴明;张少鹏;高伟明;李慧玲;潘延超 | 申请（专利权）人： | 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/08 | 分类号： | C07K16/08;C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518063 广东省深圳市前海深港合作区前*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种抗乙肝e抗原的绿色荧光抗体的制备方法，通过基因工程手段，将合成M.Barkeri的(PylRS)的DNA与质粒pBK重组，获得PylRS-pBK；以PylRS-pBK为模板，构建突变库lib-PylRS-pBK；将lib-PylRS-pBK电击转化、筛选；筛选重组CoukRS-pBK质粒；将抗HBeAg抗体的DNA与pBAD重组，获得anti-HBeAg-4tag-pBAD；分别将质粒anti-HBeAg-4tag-pBAD和CoukRS-pBK转化到感受态中，获得了制备抗乙肝e抗原绿色荧光抗体的生物表达系统。本发明实现了抗乙肝e抗原绿色荧光抗体的制备，提高了检测的灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 乙肝 抗原 绿色 荧光 抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种抗乙肝e抗原的绿色荧光抗体的制备方法，其特征在于，所述抗乙肝e抗原的绿色荧光抗体的制备方法包括如下步骤：S1：获得M.Barkeri PylRS突变库lib‑PylRS‑pBK；S2：获得7‑羟基香豆素赖氨酸；S3：筛选获得CouKRS‑pBK质粒，该质粒包括能够特异识别7‑羟基香豆素的吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶突变体CouKRS的基因序列coukrs；S4：合成抗乙肝e抗原抗体的DNA序列，将所述抗乙肝e抗原抗体的DNA序列与质粒pBAD重组，获得大肠杆菌表达质粒anti‑HBeAg‑4tag‑pBAD；S5：将步骤S3中的CouKRS‑pBK质粒和步骤S4中的anti‑HBeAg‑4tag‑pBAD质粒按照第一预设比例混合，经过电击转化，导入到大肠杆菌Top10中，经抗性筛选，获得菌株A；S6：将步骤S5获得的菌株A接种培养，在培养基中添加特定的物质，对菌株A进行培养、离心、超声破碎以及色谱柱纯化得到抗乙肝e抗原绿色荧光抗体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司，未经深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610064812.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
