[发明专利]硫黄素T适配体、其筛选方法及应用有效
申请号: | 201610064881.2 | 申请日: | 2016-01-29 |
公开(公告)号: | CN107024583B | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 裴仁军;王红沿 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;C12N15/115;C12N15/11;G01N33/52;G01N33/574;C12Q1/6886 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 215123 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种硫黄素T适配体、其筛选方法及用途。本发明利用SELEX方法筛选出光开关染料硫黄素T的适配体序列,并利用硫黄素T的光开关特性以及所述适配体与硫黄素T结合前后的结构变化设计了KRAS基因突变检测的非标记荧光生物传感器,并藉此实现了简单、高效、高选择性的KRAS基因突变检测,能够为肿瘤早期诊断和用药指导提供有效的帮助。 | ||
搜索关键词: | 硫黄 适配体 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种硫黄素T适配体的筛选方法,其特征在于包括以下步骤:1)将单链DNA文库和第一连接物标记的捕获链杂交,并将形成的杂交文库与第二连接物标记的载体孵育,使所述杂交文库固定到所述载体上,所述第一连接物和第二连接物能够特异性结合;2)将游离的核酸序列和与捕获链结合能力差的核酸序列从所述载体上洗脱,之后以硫黄素T溶液将与硫黄素T特异性作用的富集库洗脱;3)收集所述富集库并进行PCR扩增,获得筛选文库;4)以所述筛选文库作为单链DNA文库,重复进行步骤1)~步骤3)的操作,直至获得序列如SEQ ID No.3所示的硫黄素T适配体。
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