[发明专利]一种模式拟南芥的嫁接方法

摘要

本发明公开了一种模式植物拟南芥的嫁接方法，其包括以下步骤：将下胚轴粗壮、长势一致、且真叶刚刚萌发的6天‑8天苗龄的拟南芥植株用于嫁接；将用于嫁接的砧木和接穗材料置于1.2％琼脂糖凝胶中间，于下胚轴处横切，并保证接穗材料的下胚轴部分较短，而砧木材料的下胚轴部分较长；在琼脂凝胶上使材料切口紧密接触，并切割一块大于砧木根部面积的1/2MS+3％蔗糖固体培养基，盖在砧木的根部，形成嫁接体；将嫁接体置于21℃环境下垂直培养7天；待嫁接口愈合后将嫁接体转入以1/4MS为液体培养基的水培设备中培养。本发明解决了由于拟南芥植株细弱带来的操作困难，切口不圆整，接穗侧根频生，嫁接成活率低等问题。

主权项

1.一种模式拟南芥的嫁接方法，其包括以下步骤：A、将拟南芥种子经表面消毒后，接种于高温高压灭菌的添加4%蔗糖的1/2 MS 固体培养基中，经4 ℃低温春化处理后，置于弱光下处理3天‑5天，再转入光下培养3天‑5天，待下胚轴生长至6毫米‑8毫米，将下胚轴粗壮、长势一致、两片子叶平展且真叶刚刚萌发的6天‑8天苗龄的拟南芥植株用于嫁接；B、用镊子分别取出作为砧木和接穗的拟南芥实生苗，置于事先准备的多个无菌1.2%浓度琼脂糖凝胶板上，将另一无菌1.2%浓度琼脂糖凝胶板盖于相应实生苗下胚轴上，并于下胚轴偏上部位置迅速切断嫁接材料，要求切口圆整，并保证接穗材料的下胚轴部分较短，而砧木材料的下胚轴部分较长；C、将切好的嫁接材料转入0.7‑0.8%浓度琼脂凝胶上，将琼脂凝胶切除一段宽为0.5厘米‑1厘米的长条；将长为5毫米、内径/外径为0.5/1.5的塑料管以垂直于琼脂凝胶切口边缘的方式平置于凝胶上，并保证塑料管管口距离切口的距离为2毫米；将砧木与接穗分别插入塑料管内进行固定，使材料紧密接触，并使接穗材料的叶片部分置于切除条状凝胶处；切割一块大于砧木根部面积的1/2 MS+ 3%蔗糖固体培养基，盖在砧木的根部，挤出气泡，使凝胶与培养基紧密结合，形成嫁接体；D、将嫁接体置于21 ℃环境下垂直培养7天，待嫁接口愈合后，将成活的嫁接苗转入以1/4 MS为液体培养基的水培设备中继续培养，期间接穗下胚轴如有侧根发出，则及时剪去。