[发明专利]一种胃癌基因工程疫苗及其制备方法

摘要

本发明公开了一种胃癌基因工程疫苗及其制备方法，该疫苗包括GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞和佐剂；所述GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞制备步骤包括：用含GM‑CSF基因的重组仙台病毒上清液感染人胃癌细胞，得GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞；对GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞灭活并热休克处理；所述佐剂制备步骤包括：取对数生长期的人胃癌细胞接种于含体积百分比10％FBS的RPMI 1640细胞培养液中，加入15～25μmol/mL的化合物(Ⅰ)培养36～48h得细胞培养液；将细胞培养液离心弃上清液，沉淀悬浮于生理盐水中，再放入液氮中冷冻5～10分钟，再将冷冻物取出，放入37℃温水融化，如此反复冻融3～5次。佐剂可以显著增强GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞对胃癌细胞的杀伤力，二者具有显著的协同作用。

主权项

一种胃癌基因工程疫苗，其特征在于，包括GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞和佐剂；所述GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞通过如下步骤制备：步骤S1，用含GM‑CSF基因的重组仙台病毒上清液感染人胃癌细胞，得到GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞；步骤S2，对步骤S1得到的GM‑CSF基因修饰的人胃癌细胞灭活并进行热休克处理；所述佐剂通过如下步骤制备：步骤S1，取对数生长期的人胃癌细胞接种于含体积百分比10％FBS的RPMI 1640细胞培养液中，加入15～25μmol/mL的如下结构式的化合物(Ⅰ)培养36～48h得细胞培养液，步骤S2，将细胞培养液离心弃上清液，沉淀悬浮于生理盐水中，再放入液氮中冷冻5～10分钟，再将冷冻物取出，放入37℃温水融化，如此反复冻融3～5次，即可得所述佐剂。