[发明专利]一种植物根际促生菌对植物促生效能的测定方法

摘要

本发明公开了一种植物根际促生菌对植物促生效能的测定方法，包括以下步骤：（1）培养基的制备；（2）接种剂的制备；（3）植物种子的催芽；（4）种植；（5）接菌；（6）收获及指标的测定。本发明可用于测定已知菌株的促生效能及促生机理和筛选促生效能优良的未知菌株，操作简单方便、结果较为准确。

主权项

一种植物根际促生菌对植物促生效能的测定方法，包括以下步骤：（1）培养基的制备在Hoagland营养液的基础上添加一定量的琼脂，制备Hoagland半固体培养基；制备LB培养基；（2）接种剂的制备接种PGPR菌株于LB液体培养基中，于28 ℃，125 r/min培养48h，用无菌水调节菌株菌悬液浓度为1×10⁸ cfu/mL；在三角瓶内装入150 mL LB液体培养基，灭菌后置于室温下1‑2d，经检查无污染后接种20 mL上述菌悬液，于28℃，125 r/min培养2‑3d，用灭菌量筒将菌液注入灭菌玻璃瓶中常温密封保存备用；（3）植物种子的催芽选择籽粒饱满的植物种子，经0.1% HgCl₂表面消毒2‑3min，再用无菌水冲洗3‑5次后，置于盛有水琼脂培养基的培养皿中，放入25℃的培养箱中培养，待种子萌发至1‑2cm后备用；（4）种植将步骤（3）中萌发至1‑2cm的幼苗移至盛有40ml灭菌的Hoagland半固体培养基的长玻璃试管中，每个试管种植1株幼苗，放入智能人工气候培养箱中（28℃，16h光照，20000 lx，8h黑暗，相对湿度40%‑50%）2d后选择成功生长，长势一致的幼苗；（5）接菌取步骤（2）中制备的接种剂1ml在无菌条件下分别接种于步骤（4）中选择的幼苗，设不接菌对照处理，每个处理均重复3次，幼苗试管置于智能人工气候培养箱中继续培养；（6）收获及指标的测定接种菌株的幼苗培养数天（可按试验需要设定）后收获，测定植物的生物量、根系生长的特征、植物的品质等内容，分析判断菌株的促生效能。