[发明专利]一种检测人类白细胞抗原HLA-G的方法

摘要

本发明公开了一种检测人类白细胞抗原HLA‑G的方法，采用HLA‑G的重链的第85‑185位氨基酸序列的蛋白片段作为抗原制备抗体3C4，采用HLA‑G的轻链的第1‑50为氨基酸序列的蛋白片段偶联KLH后作为抗原制备抗体3H1，然后将3C4和3H1作为酶联免疫检测试剂来检测HLA‑G，所述HLA‑G的重链的第85‑185位氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，HLA‑G的轻链的第1‑50为氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的方法具有检测灵敏度高、特异性好，具有很好的可重复性和准确性，从而为检测HLA‑G提供了一种新的方法。

主权项

1.人类白细胞抗原‑G 酶联免疫试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：抗HLA‑G单克隆抗体3C4，生物素标记的抗β2‑微球蛋白单抗3H1，其制备方法为：将10ug/mL抗HLA‑G单克隆抗体3C4用标准方法包被在96孔酶标板或12×8或8×12酶标条上；将血浆或血清或细胞培养液中的可溶性HLA‑G蛋白和3C4抗体结合；再采用生物素标记的抗β2‑微球蛋白单抗3H1对被3C4抗体结合的HLA‑G蛋白进行夹心式结合；然后用Streptoavidin‑HRP 复合物结合生物素标记的抗β2‑微球蛋白单抗3H1，再采用辣根过氧化酶催化色原底物TMB显色，根据标准曲线确定检测样品中HLA‑G 的浓度；其中，抗HLA‑G单克隆抗体3C4采用HLA‑G的重链的第85‑185位氨基酸序列的蛋白片段作为抗原制备单克隆抗体3C4，抗β2‑微球蛋白单抗3H1采用HLA‑G的轻链的第1‑50为氨基酸序列的蛋白片段偶联KLH后作为抗原制备单克隆抗体3H1，所述HLA‑G的重链的第85‑185位氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，HLA‑G的轻链的第1‑50为氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。