[发明专利]一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用，其制备方法包括以下步骤：将新城疫病毒TS09‑C株生产用毒种作适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml；接种后密封针孔，继续孵育，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，将鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，吸取鸡胚液。收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素，留样后，结冻保存。将检验合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一容器内，按规定羽份，加一定比例的蔗糖脱脂牛奶作稳定剂，同时加入适宜的抗生素，定量分装，迅速进行冷冻真空干燥。本发明鸡胚免疫方法具有安全、无任何毒副反应、减少应激、免疫效果好和成本低等优点。

主权项

一种鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：接种：将新城疫病毒TS09‑C株生产用毒种进行适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；步骤2：孵育和观察：鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却；步骤3：收获：将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入抗生素，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；步骤4：疫苗配制：将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入抗生素充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于10^3.0EID₅₀，分装后迅速进行冷冻真空干燥；步骤5：疫苗检验：主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。