[发明专利]一种基于聚合物发光点的免疫探针及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201610116190.2 | 申请日： | 2016-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN105784988B | 公开（公告）日： | 2018-07-13 |
| 发明（设计）人： | 俞英;周丽娜;曹玉娟;林碧霞;水玲玲 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510631 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于聚合物发光点的免疫探针及其制备方法与应用。本发明通过CN‑PPV和PSMA反应，制备得到PDs水溶液；接着将PDs水溶液、PBS和EDC混匀，混匀，得到混合液体A；将混合液体A和亚胺硫磷抗体混合反应，得到基于聚合物发光点的免疫探针。该免疫探针能特异性识别亚胺硫磷，因此可用其定性检测亚胺硫磷、半定量或定量检测亚胺硫磷。本发明提供的定性和半定量检测方法为原位可视化检测方法；本发明提供的定量检测方法灵敏度高，特异性强，可以进行高灵敏度定量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 免疫探针 亚胺硫磷 定量检测 聚合物 发光点 制备 混合液体 混匀 半定量检测 可视化检测 特异性识别 定性检测 高灵敏度 混合反应 特异性强 灵敏度 半定量 抗体 可用 应用 定性 | ||
【主权项】：
1.一种基于聚合物发光点的免疫探针的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)聚合物点的合成及修饰：分别将聚合物CN‑PPV和PSMA溶解于THF中，得到CN‑PPV溶液和PSMA溶液；将CN‑PPV溶液、PSMA溶液和THF混合，得到均相溶液，其中，在均相溶液中，CN‑PPV和PSMA按质量比3：1～8：1配比；再将均相溶液加入到处于超声震荡状态下的超纯水中，超声震荡；接着通过氮气除去THF，浓缩，过滤，得到PDs水溶液；(2)亚胺硫磷探针的合成：将PDs水溶液、PBS和EDC混匀，得到混合液体A，其中，PDs和EDC按质量比1：2～1：6配比；将混合液体A和亚胺硫磷抗体混合，振荡反应，离心过滤，得到基于聚合物发光点的免疫探针，其中，亚胺硫磷抗体的加入量按亚胺硫磷抗体和PDs的质量比为5：(2～8)配比；步骤(2)中所述的PBS溶液为pH＝5～9、1M的PBS；步骤(2)中所述的混合液体A中PDs的浓度为0.038～0.04mg/mL；步骤(2)中所述的混合液体A中EDC的浓度为0.15～0.16mg/mL；步骤(2)中所述的振荡反应的条件为于20～38℃振荡反应1～4h。
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