[发明专利]一种胶质瘤肿瘤疫苗鼠体效力检测方法

摘要

本发明公开了一种胶质瘤肿瘤疫苗鼠体效力检验方法，采用小鼠建立模型用于临床前动物模型，实验稳定性高，且节省实验成本，方法可靠，经济高效，适用于胶质瘤疫苗的效力评价。

主权项

一种胶质瘤肿瘤疫苗鼠体效力检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、建立模型：在小鼠颅内原位注射带荧光素酶的胶质瘤细胞系GL261‑Luc2，24小时后,将荧光素酶底物注射到小鼠腹腔，通过活体成像系统观察，建立颅内荷瘤小鼠模型；(2)、免疫过程：肿瘤注射后第3天开始，间隔5‑10日给予小鼠模型胶质瘤肿瘤疫苗免疫2‑4次。(3)、疫苗免疫后每周通过活体成像系统观察记录肿瘤细胞增殖的情况，同时记录小鼠死亡时间，绘制生存曲线，计算5周存活率；(4)、距末次胶质瘤肿瘤疫苗免疫小鼠3‑14天后处死小鼠，统计小鼠脾细胞数目变化；(5)、距末次胶质瘤肿瘤疫苗免疫小鼠3‑14天后处死小鼠，对小鼠颅内肿瘤组织微环境中CD8⁺T细胞(杀伤性T细胞)，Treg细胞(调节性T细胞)和MDSC(骨髓来源的抑制性细胞)进行抗体标记，采用流式细胞术检测细胞群比例；(6)、根据以下5个指标判定胶质瘤肿瘤疫苗效力：疫苗免疫后小鼠颅内肿瘤生长缓慢或完全消失；5周存活率20％以上；脾细胞数量增加；肿瘤组织微环境中CD8⁺T细胞比例增加；Treg和MDSC比例二者或其中一种细胞比例降低。