[发明专利]家用智能检测试剂盒有效
申请号: | 201610135950.4 | 申请日: | 2016-03-10 |
公开(公告)号: | CN105675865B | 公开(公告)日: | 2018-04-03 |
发明(设计)人: | 高琪;黄威权;赵锋 | 申请(专利权)人: | 陕西瑞凯生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110 | 代理人: | 管宝伟 |
地址: | 712000 陕西省西安市西咸*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开的是家用智能检测试剂盒,它是由电子读取分析部分与单克隆抗体检测试剂构成,所述电子读取分析部分包括单片机系统、光电检测系统、电池、开关K、液晶显示器、复合金标检测探针和试纸;所述复合金标检测探针、电池、开关K、单片机系统密封在机壳内,液晶显示器安装于机壳窗口处;所述单克隆抗体检测试剂包括特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体、淋病奈瑟氏菌单克隆抗体、白色念球菌单克隆抗体、羊抗鼠IgG抗体、复合金标检测探针;本发明是基于单克隆抗体技术,直接检测感染病原体,具有特异性强、无需采血、早期诊断、速度快捷等诸多优点,具有自动检测功能,免除人为因素的干扰,直观的显示检测结果,且操作简便,成本低。 | ||
搜索关键词: | 家用 智能 检测 试剂盒 | ||
【主权项】:
家用智能检测试剂盒,其特征在于,是由电子读取分析部分与单克隆抗体检测试剂两大部分构成,所述电子读取分析部分包括单片机系统、光电检测系统、电池、开关K、液晶显示器、复合金标检测探针和试纸;所述单克隆抗体检测试剂包括特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体、淋病奈瑟氏菌单克隆抗体、白色念球菌单克隆抗体、羊抗鼠IgG抗体、复合金标检测探针;所述试纸包括金标垫、硝酸纤维素膜、样品垫、吸水垫;所述复合金标检测探针包被在金标垫上,所述复合金标检测探针是由胶体金标记的特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体、淋病奈瑟氏菌单克隆抗体、白色念球菌单克隆抗体的复合胶体金‑抗体结合物;所述硝酸纤维素膜上设有检测线1、检测线2、检测线3和对照线4,所述检测线1上包被特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体,所述检测线2上包被淋病奈瑟氏菌单克隆抗体,所述检测线3上包被淋白色念球菌单克隆抗体,所述对照线4上包被羊抗鼠IgG抗体;所述复合金标检测探针的制备方法为:(1)单克隆抗体的制备:分别用人型支原体和解尿支原体作免疫原产生腹水型支原体单克隆抗体,用淋病奈瑟氏菌作免疫原产生淋病奈瑟氏菌单克隆抗体,用白色念珠菌作免疫原产生白色念球菌单克隆抗体;(2)胶体金的制备:先将100mL的0.01%HAuCl4溶液加热至沸腾,一次性迅速加入1.4mL的1%柠檬酸三钠水溶液,继续加热至溶液由淡黄色转变为蓝黑色最终变为酒红色,颜色稳定后继续加热5min,室温冷却,加三蒸水定容至100mL,即得到胶体金溶液;制备的胶体金溶液用透射电镜镜检,确保胶体金颗粒大小一致、均匀,否则重新制备;(3)复合金标检测探针的制备:用0.1mol/LK2CO3调节上述胶体金溶液的pH为9.0,向100mL胶体金溶液中缓慢加入1.2~3.0mg/ml特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体、1.2~3.0mg/ml淋病奈瑟氏菌单克隆抗体、1.2~3.0mg/ml白色念球菌单克隆抗体,磁力搅拌器缓慢搅拌1h使其结合,加牛血清白蛋白(BSA)作为稳定剂,使得终浓度为1%,2000~4000r/min离心6~10分钟,弃上清液,沉淀用PH5~7檬酸磷酸盐缓冲液稀释至50m,制成抗体金;取抗体金1~20ml加PH5~7檬酸磷酸盐缓冲液稀释到30~60ml,加入微孔板中,‑40~‑60℃冻干,制成复合胶体金‑抗体结合物,即为本发明复合金标检测探针;所述试纸的制备方法为:(1)硝酸纤维素膜上检测线的制备:将特异性识别生殖道支原体的单克隆抗体、淋病奈瑟氏菌单克隆抗体、白色念球菌单克隆抗体分别以0.1~3mg/ml的浓度在硝酸纤维素膜上按从左至右的顺序划线,分别为检测线1、检测线2和检测线3,相邻两膜线间的距离为5~6mm,粗细均匀,喷完检测好的膜需立即放入30~40℃烘干10~12小时;(2)硝酸纤维素膜上质控线的制备:将羊抗鼠IgG抗体按0.1~1mg/ml的浓度在硝酸纤维素膜上划线,该膜线为质控线,位于检测线3的右侧,距离检测线3的距离为5~6mm,粗细均匀,喷完检测好的膜需立即放入30~45℃的烘干10~12小时;(3)金标垫的制备:用复合金标检测探针溶液喷涂经预处理的金标垫,制得包含复合胶体金‑抗体结合物的金标垫;将金标垫在20~40℃下干燥0.5~1小时;(4)将吸水垫粘贴在所述纤维素膜的远离检测线的一端,将金标垫粘贴在纤维素膜的靠近检测线的一端,将样品垫粘贴于金标垫上与所述纤维素膜相对的一端,即制成试纸。
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