[发明专利]以子叶节为外植体建立葫芦高效再生体系的方法

摘要

本发明具体涉及一种以子叶节为外植体建立葫芦高效再生体系的方法，所述方法包括以下步骤：(1)挑取成熟饱满的种子，去壳得籽粒并消毒，转接到MS基础培养基上培养，得无菌苗；(2)取无菌苗，得子叶节外植体；(3)将子叶节外植体接种于不定芽诱导培养基MS1中培养，得不定芽簇；(4)将不定芽簇从外植体上剥离，转接至继代培养基MS2中，待不定芽长到3‑4cm高时，分开不定芽簇，得单个不定芽苗；(5)将单个不定芽苗转接至生根培养基MS3中，培养至生根；(6)将生根的再生植株进行炼苗处理；(7)炼苗完成后，取幼苗，移栽于育苗基质中，温室培养。本发明提供的方法不仅芽诱导率高、操作简单、易于实施，适用于葫芦种质创新、遗传改良等基因操作。

主权项

一种以子叶节为外植体建立葫芦高效再生体系的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)挑取成熟饱满的种子，去壳得籽粒，将籽粒做消毒处理，再转接到无激素的MS基础培养基上黑暗环境下恒温培养至种子萌发，获得无菌苗；(2)取无菌苗，切去胚芽和下胚轴，分开子叶，每半片子叶横切，获得子叶节外植体；(3)将子叶节外植体接种于不定芽诱导培养基MS1中培养，期间定期更换培养基，获得不定芽簇；(4)将不定芽簇从外植体上剥离，转接至继代培养基MS2中，继续培养，期间定期更换培养基，待不定芽长到3‑4cm高时，分开不定芽簇，获得单个不定芽苗；(5)将单个不定芽苗转接至生根培养基MS3中，培养至生根；(6)将生根的再生植株进行炼苗处理；(7)炼苗完成后，取出再生苗，洗去根部培养基，移栽于育苗基质中，放于温室培养。