[发明专利]牙源性间充质干细胞实现软骨再生的方法在审

专利信息
申请号: 201610170363.9 申请日: 2016-03-23
公开(公告)号: CN107224613A 公开(公告)日: 2017-10-03
发明(设计)人: 张建国;周彦恒;施松涛 申请(专利权)人: 北京泰盛生物科技有限公司
主分类号: A61L27/38 分类号: A61L27/38;A61L27/50;A61L27/58
代理公司: 上海精晟知识产权代理有限公司31253 代理人: 冯子玲
地址: 102206 北京市昌平区科技园区回龙观中*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种牙源性间充质干细胞实现软骨再生的方法,其特征在于通过一种新型的共载体系作为牙源性间充质干细胞介导软骨分化的载体,这种新型共载体系载有TFG‑β1、精氨酸‑甘氨酸‑天冬氨酸(RGD)耦合的藻酸盐微球包裹着牙周膜干细胞或牙龈间充质干细胞。该共载体系是一个三维的可注射可生物降解的软骨组织工程细胞运载支架,通过体内体外试验验证了本材料是一种高质量软骨再生模型,并说明了微环境和诱导信号(TFG‑β1)对本材料中牙源性间充质干细胞存活和成软骨分化的重要作用,第一次介绍了PDLSCs和GMSCs两种有望运用于颞下颌关节修复的软骨再生种子细胞。
搜索关键词: 牙源性间充质 干细胞 实现 软骨 再生 方法
【主权项】:
牙源性间充质干细胞实现软骨再生的方法,其特征在于,该方法包含以下步骤:步骤a.祖细胞提取和培养选择并提取第三磨牙的牙周膜干细胞和牙龈间充质干细胞,要求:18‑25岁的健康男性成人,无牙周病史;为评估克隆形成,在培养皿中植入0.1*106个细胞并培养14天,再用甲苯胺蓝染色,将超过50个细胞数的克隆作为一个阳性CFU‑F。实验组选用第四代细胞,人骨髓间充质干细胞作为阳性对照组;步骤b.细胞流式分析选取数量约为5*105个第四代细胞,用PE或者FITC鼠单克隆抗人CD34和CD45流式抗体孵育,以及CD73、CD105、CD146、CD166(间充质干细胞表面标志物)或lgGs作为同型对照;步骤c.生物材料的制备采用高浓度古罗糖醛酸的RGD‑coupled藻酸盐,对其进行处理以提高降解性,并与TGF‑β1混合;步骤d.细胞的包被选取PDLSC和GMSC以及作为阳性对照的hBMMSC以2*106cells/ml的密度包被在上述藻酸盐中以形成微球。
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