[发明专利]一种电化学生物传感器的制备方法及检测DNA甲基转移酶活性的方法

摘要

本发明公开了一种电化学生物传感器的制备方法及检测DNA甲基转移酶活性的方法，与现有技术相比，本发明通过甲基化的DNA修饰到电极上，从而使耦联了二茂铁‑抗甲基化抗体修饰到电极上，实现亚甲蓝和二茂铁信号的转换，将二茂铁与亚甲蓝的电信号比例构建与DNA转甲基酶浓度的线性关系，实现对DNA甲基化行为的检测。本发明提供的检测方法对DNA转甲基酶的检测具有灵敏度高、检测限低、选择性好的特点。

主权项

一种电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：（1）制备二茂铁‑抗甲基化抗体；（2）制备发夹DNA1和发夹DNA2缓冲溶液；（3）将发夹DNA1甲基化；（4）制备发夹DNA2修饰的金电极；（5）构建得到电化学生物传感器：将甲基化的发夹DNA1滴加到发夹DNA2修饰的金电极上，室温下培养后得到修饰的金电极，将步骤（1）得到的二茂铁‑抗甲基化抗体标记物滴加到修饰的金电极表面，室温下培养，清洗，得到电化学生物传感器，实现亚甲蓝和二茂铁信号的转换；步骤（2）中发夹DNA1序列为: 5′‑CCGGGTAGAGCTCCCTTCAATCCAACATGATA CCCGG‑3′；发夹DNA2序列为: 5’‑SH‑CCGGGTATCATGTTGGATTGAAGGGAGCTC TACCCGG‑MB‑3’。