[发明专利]一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒及检测方法在审

专利信息
申请号: 201610180011.1 申请日: 2016-03-25
公开(公告)号: CN105675886A 公开(公告)日: 2016-06-15
发明(设计)人: 王艳伟;但汉并;范俊青;贾慧琴;周云朵;韦奇勇;李盼盼;董晓辉;徐高原 申请(专利权)人: 武汉科前生物股份有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/569
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 王敏锋
地址: 430070 湖北省武汉*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明的目的是在于提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒,该试剂盒的优点在于使用了合成肽为包被抗原和辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体,减少了非特异性反应,提高了检测的灵敏性和特异性。本发明的另一个目的是在于提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒的检测方法,该方法敏感性强、特异性好与其荷兰Ceditest试剂盒的总符合率为91.06%,有着很好的应用前景。
搜索关键词: 一种 口蹄疫病毒 结构 蛋白 abc 抗体 阻断 elisa 试剂盒 检测 方法
【主权项】:
一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒,包括酶标板、样品稀释液、辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体、阳性对照、阴性对照、显色液A、显色液B、终止液、洗涤液;其特征在于:所述的酶标板是以GPYTGPLERQKPLKC作为合成肽的序列与载体蛋白OVA进行偶联的多肽作为包被抗原,以0.1mol/LpH9.6的碳酸氢钠溶液作为包被缓冲液;所述的样品稀释液:含0.5%M/VBSA的PBS缓冲溶液;所述的辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体,以合成肽作为免疫原制备的单克隆抗体;所述的阳性对照血清为合成肽抗原免疫的兔高免血清;所述的阴性对照为未感染口蹄病毒的健康猪牛羊血清;所述的显色液A为含有50mg/mL的过氧化氢脲的柠檬酸盐缓冲溶液;所述的显色液B为含有0.2mg/mL TMB,pH5.0的柠檬酸/柠檬酸钠缓冲溶液;所述的终止液为含0.25%体积比氢氟酸溶液;所述的洗涤液为含有0.05%V/VTween‑20的PBS缓冲液。
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