[发明专利]一种石蒜属植物快速增殖的离体原生鳞茎分生法

摘要

本发明涉及植物快速繁殖技术，旨在提供一种石蒜属植物快速增殖的离体原生鳞茎分生法。该种石蒜属植物快速增殖的离体原生鳞茎分生法包括种子的萌发培养、原生鳞茎的增殖培养和不定芽的膨大培养，直至获得显著膨大的小鳞茎。本发明利用种子萌发的原生鳞茎为外植体，通过离体鳞茎的基盘切割方法，进行增殖、膨大培养，显著降低了污染率、减少了对石蒜属植物野生种球资源的损耗，并可在短期内高效率获得大量发育同步程度高、性状一致的种质群体。

主权项

一种石蒜属植物快速增殖的离体原生鳞茎分生法，其特征在于，具体包括下述步骤：(1)种子的萌发培养在超净工作台上，取灭菌后的石蒜属植物种子接种到萌发培养基中，在光照强度为12.5μmol·m‑2·s‑1、光照时间为14h·d‑1、温度为(25±2)℃的组培条件下，进行20～30天的培养后，种子萌发形成原生鳞茎；所述萌发培养基以MS培养基为基本培养基，即每升培养基中添加有4.43gMS粉，萌发培养基中还仅含有浓度为0.2mg/L的α‑萘乙酸、浓度为1.0mg/L的6‑苄氨基腺嘌呤、30g/L的蔗糖、8g/L的琼脂；且萌发培养基的pH值为5.8；所述石蒜属植物种子采用天然自交、人工杂交的石蒜属植物种子，包括换锦花种子、长筒石蒜种子、红蓝石蒜种子、换锦花与长筒石蒜的杂交种子、红蓝石蒜与换锦花的杂交种子；(2)原生鳞茎的增殖培养种子萌发形成原生鳞茎后，继续培养45～60天，在超净工作台上夹出种子萌发出的鳞茎，并接种到增殖培养基上后，在光照强度为12.5μmol·m‑2·s‑1、光照时间为14h·d‑1，温度为(25±2)℃的组培条件下，进行2～3个月的增殖培养获得鳞茎丛；所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，即每升培养基中添加有4.43gMS粉，增殖培养基中还仅含有浓度为5mg/L的α‑萘乙酸、5.0mg/L的6‑苄氨基腺嘌呤、60g/L的蔗糖、8g/L的琼脂；且增殖培养基的pH值为5.8；(3)不定芽的膨大培养从增殖培养基上取出鳞茎丛，剥落能分开的不定芽，将不定芽的基盘朝下插入膨大培养基；所述膨大培养基以MS培养基为基本培养基，即每升培养基中添加有4.43gMS粉，膨大培养基中还仅含有浓度为2.0mg/L的α‑萘乙酸、60g/L的蔗糖、8g/L的琼脂；且膨大培养基的pH值为5.9；然后，在光照条件为全黑暗条件或光照强度为12.5μmol·m‑2·s‑1、光照时间14h·d‑1条件，温度条件为温度为(25±2)℃的组培条件下，继续培养2～3个月，即获得显著膨大的小鳞茎，直径在5～12mm之间。