[发明专利]一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种快速检测食品中黄曲霉毒素的新方法，主要将现行黄曲霉毒素的柱前衍生技术与柱后衍生技术结合，柱前衍生反应在紫外光线照射下进行，使衍生反应进行的完全且产生的荧光强，衍生产物荧光稳定性好，同时又提高了检测灵敏度。与现有标准中黄曲霉毒素测定方法相比，该法具有检测灵敏度高，不需要柱后光衍生设备，重现性好、准确等特点。

主权项

一种高灵敏检测黄曲霉毒素的方法及其应用，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)工作曲线的制作：配制黄曲霉毒素B1及黄曲霉毒素G1混合标准溶液0.5～200ng/mL，加入一定量的衍生试剂，在紫外灯下照射一定时间进行衍生反应，在选定色谱条件下进高效液相色谱进行测定，得到黄曲霉毒素回归方程、相关系数、相对标准偏差、回收率。(2)样品提取①对于大米、玉米、小麦、花生、核桃、杏仁及其制品及中药提取方法为：准确称取粉碎均质后的样品2～5g，精确至0.0001g，加入体积分数为70～80％的乙腈水溶液20～50mL，剧烈振荡1min，50±2℃水浴超声提取20～30min，以3500～5000r/min离心5～10min，取出上层溶液，重复提取2～3次，合并上清液，待用；②对于酱油、食醋、植物油脂提取方法为：准确称取5.00～10.00g样品，加入2～5g NaCl和体积分数为70～80％的乙腈水溶液20～50mL，涡旋混合1～3min，定量滤纸过滤，准确吸取5.00mL滤液，加入10mL超纯水稀释，混匀，待用。(3)样品测定取步骤(2)中的提取液，按照步骤(1)进行荧光衍生，在与步骤(1)相同色谱条件进行HPLC分析，并对照步骤(1)所得的线性回归方程，计算样品中黄曲霉毒素的含量。