[发明专利]一种提取棉花线粒体及其蛋白质的方法有效
| 申请号： | 201610217260.3 | 申请日： | 2016-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN107266521B | 公开（公告）日： | 2020-07-14 |
| 发明（设计）人： | 华金平;陈志文;聂虎帅;王梅燕;李双双;裴海丽 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 100093 北京市海淀区圆*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提取棉花线粒体及其蛋白的方法。本发明的方法对线粒体机械损伤程度最小，可以有效的除去线粒体以外的核组分、质体组分，以及酚类、多糖类物质，降低污染率，提高线粒体蛋白质的纯度和质量。满足了棉花基因组研究、线粒体蛋白组及代谢调控网络等研究工作的实验技术需求，拓宽了相关研究工作的领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 棉花 线粒体 及其 蛋白质 方法 | ||
【主权项】：
一种提取植物线粒体蛋白的方法，包括如下步骤：(1)将植物样品进行匀浆，过滤，收集滤液；将所述滤液进行差速离心，收集沉淀；(2)洗涤步骤(1)获得的沉淀，得到体系A，将所述体系A进行差速离心，收集沉淀；(3)向步骤(2)获得的沉淀中加入Buffer B溶液，进行蔗糖密度梯度离心，收集梯度36％与梯度52％之间的黄色液体层，即得到线粒体；所述蔗糖密度梯度离心的蔗糖密度梯度为将60％蔗糖溶液、52％蔗糖溶液、36％蔗糖溶液和20％蔗糖溶液分层制备，得到蔗糖密度梯度；(4)从步骤(3)获得的线粒体中提取蛋白。
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