[发明专利]一种依赖核酸内切酶活性的核酸等温检测技术和试剂

摘要

本发明涉及一种核酸检测技术，具体而言是一种依赖核酸内切酶活性的核酸检测技术和试剂。本发明所使用的分子探针在没有和目的核酸片段结合时，保持一种二级结构，此时在该结构上没有特定的核酸内切酶的切点。而当有目的核酸片段存在时，探针DNA分子能够和目的片段结合改变其二级结构，具有能够被特定DNA内切酶识别的识别位点和能够被该内切酶切开的酶切位点。内切酶切开探针后可被检测。该方法具有识别序列较短，对引物位置要求较低，检测体系简单，检测效率较高，DNA和RNA均能直接检测等特点。

主权项

一种依赖核酸内切酶活性的核酸等温检测技术和试剂，其特征在于，这种依赖核酸内切酶活性的核酸等温检测技术使用一种特殊的探针DNA分子，该探针DNA分子在没有和目的核酸片段结合时，在溶液中保持一种二级结构，此时在该结构上没有特定的核酸内切酶的切点；而当有目的核酸片段存在时，探针DNA分子能够识别目的片段上的特异性序列并和其互补配对形成双链结构，从而改变探针DNA分子的二级结构，此时形成了至少具有三段双链结构的的核酸分子；且其中两条双链为探针和目的核酸分子之间形成的，而另一条双链则为探针DNA分子自己折叠形成的，这条探针DNA分子自己折叠形成的双链上，具有能够被特定DNA内切酶识别的识别位点和能够被该内切酶切开的酶切位点，形成检测中间体。