[发明专利]检测利巴韦林的酶联免疫试剂盒及其应用

摘要

本发明提供了一种检测利巴韦林的酶联免疫试剂盒，它包括包被有包被原的酶标板、利巴韦林标准品溶液、酶标抗体、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液，所述包被原为利巴韦林偶联抗原，所述酶标抗体为酶标记的利巴韦林抗体。本发明还公开了一种应用上述酶联免疫试剂盒检测利巴韦林的方法，它包括首先进行样品前处理，然后用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明提供的酶联免疫试剂盒可用于检测动物组织样本中利巴韦林的含量，其操作简便、费用低廉、灵敏度高、能够现场监控且适合大量样本的筛查。

主权项

一种利巴韦林酶联免疫检测试剂盒的制备方法，其中包括制备包被有包被原的酶标板、利巴韦林标准品溶液、酶标抗体、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液，所述包被原为利巴韦林偶联抗原，所述酶标抗体为酶标记的利巴韦林抗体，所述利巴韦林偶联抗原为利巴韦林半抗原与载体蛋白的偶联物，所述利巴韦林半抗原的制备方法主要包括如下步骤：(1)取(9ci)‑5‑硝基‑1H‑1,2,4‑噻唑‑3‑羧酰胺5g，加β‑D‑呋喃核糖‑1,2,3,5‑四乙酸酯3.26g，加DMSO溶解，加双(对硝基苯基)磷酸酯1.2g，油浴加热，170℃反应2h；停止反应，加水，乙酸乙酯萃取，蒸干，上硅胶柱，石油醚与乙酸乙酯的体积比是2：1，洗脱分离，得到中间体a 4.15g；(2)取中间体a加氢氧化钠水溶液溶解，60℃反应2h，停止反应，中和，旋蒸，蒸干，加乙醇重结晶，得到硝基利巴韦林2.11g；(3)取硝基利巴韦林2.1g，加甲醇溶解，加催化量钯碳，加氢气，室温搅拌6h，检测，原料反应完全，抽滤除去钯碳，旋蒸蒸干，得到油状物，1,2‑二氯乙烷重结晶得到氨基利巴韦林半抗原产物1.21g。