[发明专利]一种制备固定化芳香化酶的方法有效
| 申请号： | 201610268351.X | 申请日： | 2016-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN105713892B | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 苏梦翔;柏印;靖雅;狄斌 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C12P33/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211198 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种制备固定化芳香化酶的方法。该方法采用环氧基功能化修饰的介孔硅球在低温下吸附固定芳香化酶，固定化酶持续催化时失活半衰期有所提高，游离的芳香化酶在40min后催化反应速率有所降低，而固定化酶在80min后催化反应速率才有所降低。固定化率可达90％以上，并且固定化酶可以重复利用多次，解决了游离芳香化酶持续催化时易失活，参加反应后不可回收利用的弱点，使得该固定化酶在医药研究领域对于构建新型的芳香化酶抑制剂的快速筛选技术平台具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 固定 芳香 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备固定化芳香化酶的方法，其特征在于包括如下步骤：(a)球形介孔硅胶用10％盐酸活化即得固体介质A(b)制备环氧基修饰的介孔硅胶为固体介质B(c)芳香化酶用磷酸钾缓冲液稀释所得的溶液为液体介质C，其中酶浓度为10pmol/mL～40pmol/mL(d)将固体介质B用磷酸钾缓冲液洗涤三次后，与液体介质C混合，低温下旋转震摇30min以上，离心除去上清液，沉淀经低温离心洗涤后分散保存于磷酸钾缓冲液即得固定化酶。
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