[发明专利]无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法在审
| 申请号： | 201610270692.0 | 申请日： | 2016-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN107312809A | 公开（公告）日： | 2017-11-03 |
| 发明（设计）人： | 王继红;时春风;张欣;张素杰;郑媛媛;李庆伟 | 申请（专利权）人： | 辽宁师范大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 大连非凡专利事务所21220 | 代理人： | 闪红霞 |
| 地址： | 116029 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法，按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达，收集菌体，采用高压均质机进行菌体细胞破碎，得破菌液；过滤破菌液得澄清液；将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获；利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化；利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化；蛋白纯度达99%。 | ||
| 搜索关键词： | 内毒素 rlj rgd3 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法，其特征在于按如下步骤进行：a. 将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达，收集菌体，采用高压均质机进行菌体细胞破碎，得破菌液；b. 过滤破菌液得澄清液；c．将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获；d. 利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化；e. 利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化。
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