[发明专利]一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法

摘要

本发明涉及一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，包括如下步骤1)愈伤组织的诱导将外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；2)愈伤组织的分化将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种到后期分化培养基中，至分化出芽；3)生根培养将所述芽接种到生根培养基中进行生根培养，得苜蓿幼苗。本发明所述的方法，通过对外植体和培养基的优化选择，进一步结合适宜的培养条件和操作方法，可实现保定苜蓿的高效再生。

主权项

一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：1)外植体的选择：选择发芽4～6天的苜蓿幼苗的子叶作为外植体；2)愈伤组织的诱导：将所述外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；所述愈伤诱导培养基为添加了3mg/L 2,4‑D、0.2mg/L 6‑BA、25～35g/L蔗糖和2～6g/L植物凝胶的MS培养基；3)愈伤组织的分化：将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种到后期分化培养基中，至分化出芽；所述前期分化培养基为添加了0.4mg/L 6‑BA、25～35g/L蔗糖和2～6g/L植物凝胶的MS培养基；所述后期分化培养基为添加了14～16g/L蔗糖和2～6g/L植物凝胶的1/2MS培养基；4)生根培养：将所述芽接种到生根培养基中进行生根培养，得苜蓿幼苗；生根培养基为添加了1.0mg/L NAA、10～20g/L蔗糖和5～9g/L琼脂的1/2MS培养基；所述愈伤诱导培养基、前期分化培养基、后期分化培养基和生根培养基的pH均为5.8。