[发明专利]一种视网膜节细胞特异性表面蛋白的筛选方法在审
申请号: | 201610290827.X | 申请日: | 2016-05-04 |
公开(公告)号: | CN107345218A | 公开(公告)日: | 2017-11-14 |
发明(设计)人: | 王晓冰 | 申请(专利权)人: | 上海大垚生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201821 上海市嘉定*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种视网膜节细胞特异性表面蛋白的筛选方法,筛选出节细胞特异性表面蛋白、该表面蛋白特异性的表达在人胚胎干细胞以及人多能干细胞来源的视网膜节细胞前体细胞的细胞膜表面,这将提供一种简单的方法用于人多能干细胞来源的视网膜节细胞前体细胞的纯化。通过表面蛋白筛选获得的纯化节细胞,可以避免转基因或者应用多种小分子化合物为诱导剂所带来的潜在危险。这一关键科学问题的解决,将加快干细胞向临床转化的过程,符合医学研究的需要,为人类青光眼的细胞替代治疗奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 视网膜 细胞 特异性 表面 蛋白 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种视网膜节细胞特异性表面蛋白的筛选方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将人多能干细胞诱导分化至第6周的视网膜细胞球在含有Ⅱ型胶原酶的Hanks溶液中消化过夜,得到细胞悬液;(2)第二天,在细胞悬液中加入等体积的含有Ⅱ型胶原酶、牛磺酸、乙二醇双(2‑氨基乙基醚)四乙酸、牛血清白蛋白的Hanks溶液进一步消化,获得单细胞;(3)应用BD公司的细胞表面蛋白筛选试剂盒对消化的单细胞进行筛选、筛选出CD抗体,然后对CD抗体进行筛选、确定节细胞特异性表面蛋白。
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