[发明专利]一种猪流感阳性血清的制备方法

摘要

本发明公开了一种猪流感阳性血清的制备方法，其包括选择免疫验对象、免疫接种、收获血清，本发明通过猪流感灭活疫苗免疫鸡制备阳性血清，减小了用猪制备阳性血清因同源动物而引起的同源其他外源病毒污染的风险，本发明猪流感阳性血清可应用于毒株的鉴定、毒株纯净性检验以及紧急免疫。

主权项

一种猪流感阳性血清的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：1) 选择2～4月龄的鸡；2）用猪流感灭活疫苗对鸡进行多次免疫接种：对鸡采用皮下及肌肉多点注射方式免疫猪流感灭活疫苗，第1次免疫0.5‑0.6mL，以后每隔14～15天免疫一次，每次免疫量为每只鸡每次依上次免疫量增加0.5‑0.6mL，总共免疫4次以上；从第3次免疫开始，每次免疫前1天，采少量免疫鸡的鸡血用0.5%鸡红细胞悬液进行HI试验，检测HI抗体滴度，当检测到HI抗体滴度≥1:1024，用心脏采血法对免疫鸡进行无菌采血；3）上述步骤采血得到的鸡血在37℃环境放置2～3h，然后将鸡血移入2～8℃冰箱12～24h；4）上述鸡血以3000～3500r/min的转速离心10‑15min，分离收获上清液，5）将上清液于56℃下灭活30‑35min，得到灭活后的血清，过滤，得到猪流感阳性血清。