[发明专利]一种瑞加诺生有关物质的高效液相色谱分析方法

摘要

本发明公开了一种瑞加诺生有关物质的高效液相色谱分析方法，该方法采用反相色谱柱及紫外检测器，以1‑烷基磺酸钠溶液‑甲醇为流动相，进行梯度洗脱。本方法可同时分析瑞加诺生原料及制剂中的所有已知杂质，并且可通过加校正因子的主成分自身对照法有效控制各已知杂质的含量，各杂质峰之间及主峰与相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5，主峰与各杂质峰的峰纯度均大于1.0。本发明为瑞加诺生原料及制剂的质量控制提供了简易和可靠的分析方法。

主权项

一种检测瑞加诺生有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)色谱条件设置：采用反相C18柱是Agilent C18色谱柱，柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm；洗脱液由流动相A和流动相B构成，流动相A为1‑戊烷磺酸钠的磷酸盐缓冲体系，所述1‑戊烷磺酸钠的浓度为15mmol/L；缓冲体系中磷酸的浓度为0.02mol/L，用氢氧化钠调节pH为4.2；流动相B为甲醇；梯度洗脱程序是：0min‑40min，流动相A占洗脱液的体积百分比由90％逐步递减至55％；40min‑50min，流动相A占洗脱液的体积百分比由55％逐步递减至40％；50min‑50.01min，流动相A占洗脱液的体积百分比由40％直接转换为90％；50.01min‑60min，流动相A占洗脱液的体积百分比90％；柱温为35℃，流速为1.0ml/min，检测波长为247nm；(2)供试品溶液制备：取瑞加诺生原料药或注射液适量，配制成浓度为0.01‑1.0mg/ml的瑞加诺生溶液；(3)对照溶液制备：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用洗脱液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；(4)系统适应性溶液制备：分别取瑞加诺生对照品、杂质D对照品、杂质G对照品、杂质A对照品、杂质I对照品、杂质H对照品、杂质J对照品、杂质F对照品各适量，加甲醇溶解，并用稀释剂制成每1ml中各含约0.4μg的溶液，作为系统适应性溶液；(5)检测：精密量取系统适应性溶液20μl，注入液相色谱仪，各杂质峰之间的分离度应符合要求；再精密量取对照溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；其中，各杂质的化学结构如下所示，