[发明专利]一种提高珍珠番石榴成活率的组织培养方法

摘要

本发明涉及植物组织培养领域，公布了一种提高珍珠番石榴成活率的组织培养方法，发明的组织培养方法包括以下步骤(1)培养室消毒；(2)外植体的选择；(3)外植体的灭菌；(4)初始诱导培养；(5)继代培养；(6)炼苗，该方法利用植物处理液对外植体进行消毒，提高了在组织培养过程中外植体的成活率，同时还利用木薯酒精废液替代常用的MS培养基，能有效降低组培成本，利用本发明的组织培养方法，不仅能应用与珍珠番石榴的多种外植体，还能有效的对外植体表面进行消毒，还不会对外植体进行侵害，同时还能有效降低生产成本。

主权项

一种提高珍珠番石榴成活率的组织培养方法，其特征在于，该组织培养方法包括以下步骤：(1)培养室消毒：培养前12h‑14h向关闭门窗的培养室进行灭菌消毒；(2)外植体的选择：选择珍珠番石榴果树顶芽为外植体，外植体长1cm‑2cm，直径0.4cm‑0.8cm；(3)外植体的灭菌：外植体经过水冲洗、75％的酒精浸泡沥干后，在质量浓度为8％‑10％的植物处理液中浸泡20min‑25min进行灭菌，所述植物处理液的组成及重量百分比为：30％‑50％的灵芝提取液、10％‑15％的辣蓼草提取液、5％‑15％的大蒜提取液、10％‑15％的洋葱提取液、5％‑10％的藿香提取液、5％‑15％的仙人掌提取液、5％‑10％的螺旋藻提取液；(4)初始诱导培养：将灭菌后的外植体接种在诱导培养基中在培养箱中进行诱导培养，培养温度为24℃‑26℃，用白色的LED光灯进行光照，光照强度为500Lx‑800Lx，光照时间为12h‑16h；(5)继代培养：将步骤(4)中长出新芽的外植体转接入继代培养基中在培养箱中进行继代培养，培养温度为24℃‑26℃，用白色的LED光灯进行光照，光照强度为700Lx‑1400Lx，光照时间为18h‑20h，随着外植体的生长不断更换培养基，继代培养5‑7代后将长成生根苗的幼苗转接到放好培养基质的营养杯中进行培养；(6)炼苗：将营养杯中的珍珠番石榴幼苗放在大棚中进行炼苗，炼苗温度为22℃‑26℃，光照为日光照射；所述步骤(4)的诱导培养基组成为：COD含量为300mg/L‑800mg/L的15％‑20％木薯酒精废液，2g/L‑5g/L的蔗糖，3g/L‑5g/L的灵芝提取液，8g/L‑10g/L的螺旋藻提取液，2g/L‑4g/L的辣蓼草提取液，4.0g/L‑7.0g/L的琼脂，0.3mg/L‑0.6mg/L的萘乙酸；所述步骤(5)的继代培养基组成为：COD含量为500mg/L‑1000mg/L的15‑20％木薯酒精废液，5g/L‑8g/L的蔗糖，3g/L‑5g/L的灵芝提取液，2g/L‑5g/L的螺旋藻提取液，2g/L‑4g/L的辣蓼草提取液，6.0g/L‑10.0g/L的琼脂。