[发明专利]一种NK细胞无血清培养基

摘要

本发明涉及一种NK细胞无血清培养基及其配制方法，该配制方法包括将脂肪酸负载到无脂肪酸白蛋白上后，再将所获得的白蛋白溶液添加到基础培养基中，由此获得的NK细胞无血清培养基成分更稳定，功能一致性更好，不会因白蛋白的种属来源或加工批次的差异有所不同。本发明的培养基中还加入了聚肌胞，聚肌胞可诱导免疫细胞的分化、成熟或者分泌细胞因子，如IL‑12、IL‑15、TNFa、IFN‑r等，促进免疫细胞的活化增殖的能力；聚肌胞还可以促进膜结合型IL‑15Ra表达的能力，IL‑15Ra可与IL‑15紧密结合，这种结合状态的IL‑15对NK细胞有更强烈的促活化和促增殖的效应。本发明提供的NK细胞无血清培养基更适合高效培养NK细胞，提高增值倍数。

主权项

一种应用于NK细胞的NK细胞无血清培养基，所述NK细胞无血清培养基包括基础培养基、适用于所述NK细胞无血清培养基的血清替代物、聚肌胞，所述血清替代物包含白蛋白、人转铁蛋白、胰岛素和胆固醇，其特征在于：所述白蛋白是通过在无脂肪酸白蛋白上负载脂肪酸而形成的；所述白蛋白是通过在无脂肪酸白蛋白上负载特定的脂肪酸而形成的；所述特定的脂肪酸由棕榈酸和/或硬脂酸、油酸和亚油酸组成；按照每1mmol无脂肪酸白蛋白添加0.4‑2mmol的棕榈酸和/或硬脂酸，0.4‑2mmol的油酸和0.4‑2mmol的亚油酸的比例，将所述特定的脂肪酸添加到所述无脂肪酸白蛋白的溶液中混合而形成；或者，所述特定的脂肪酸由棕榈酸和/或硬脂酸、油酸、亚油酸和花生四烯酸组成，所述步骤二中，按照每1mmol无脂肪酸白蛋白添加0.4‑2mmol的棕榈酸和/或硬脂酸，0.4‑2mmol的油酸和0.4‑2mmol的亚油酸的比例，所述花生四烯酸与所述亚油酸的添加量的比值为1:6～1:1，将所述特定的脂肪酸添加到所述无脂肪酸白蛋白的溶液中混合而形成。