[发明专利]裂解液、提取液、裂解和提取方法、试剂盒及应用、PCR体系有效
申请号: | 201610656613.X | 申请日: | 2016-08-11 |
公开(公告)号: | CN106282160B | 公开(公告)日: | 2019-05-28 |
发明(设计)人: | 管峰;薛超波;赵进;王萍亚 | 申请(专利权)人: | 中国计量大学;舟山市食品药品检验检测研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138 | 代理人: | 江崇玉 |
地址: | 310018 浙江省杭州市下沙高*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种裂解液、DNA提取液、裂解和提取方法、DNA提取试剂盒及应用、PCR体系。该裂解液,用于裂解鱼类组织而释放出DNA,包括:乙二胺四乙酸和/或乙二胺四乙酸钠盐、氯化钠、十二烷基硫酸钠、强碱以及水,其中相对于裂解液而言,乙二胺四乙酸和/或乙二胺四乙酸钠盐的摩尔浓度为2~10mM,氯化钠的摩尔浓度为1~10mM,十二烷基硫酸钠的质量分数为0.1~10%,并且强碱的氢氧根离子的摩尔浓度为100~300mM。与现有技术相比,本发明的裂解液可以在更短时间内提供鱼类组织PCR扩增所需的DNA模板,整个过程不会造成样本DNA的减少或丢失,并且操作简单方便,易于掌握。 | ||
搜索关键词: | 裂解液 裂解 氯化钠 乙二胺四乙酸钠盐 十二烷基硫酸钠 强碱 乙二胺四乙酸 鱼类组织 氢氧根离子 质量分数 样本DNA 试剂盒 提取液 应用 释放 | ||
【主权项】:
1.一种双组分型鱼类组织DNA提取液,其特征在于,包括作为第一组分的裂解液和作为第二组分的中和液,所述裂解液由以下组分组成:乙二胺四乙酸和/或乙二胺四乙酸钠盐、氯化钠、十二烷基硫酸钠、强碱以及水,其中相对于裂解液而言,乙二胺四乙酸和/或乙二胺四乙酸钠盐的摩尔浓度为2~10mM,氯化钠的摩尔浓度为1~10mM,十二烷基硫酸钠的质量分数为0.1~10%,并且强碱的氢氧根离子的摩尔浓度为100~300mM;所述中和液包括:含有吐温‑20的pH值为6.4~7.4的Tris‑HCl缓冲液,其中所述中和液中的吐温‑20的质量分数为0.02%~0.1%,所述中和液中的Tris的摩尔浓度为0.2~1mM。
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