[发明专利]基于重组载体pGPE57的重组菌株E.coliGPE10及其构建方法和应用在审
申请号: | 201610713076.8 | 申请日: | 2016-08-23 |
公开(公告)号: | CN107760704A | 公开(公告)日: | 2018-03-06 |
发明(设计)人: | 汪洋;张开;易军;苏会娟 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心32203 | 代理人: | 刘海霞,朱显国 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组载体pGPE57和重组菌株E.coli GPE10的构建及应用,属于生物技术领域,质粒pGPE57和重组菌株E.coli GPE10含有Amp、AraC、Pbad、gam、pfu‑Ssod7和exo基因元件。重组载体pGPE57和重组菌株E.coli GPE10可以通过阿拉伯糖诱导表达重组酶系统,通过同源序列之间的重组完成细胞内的DNA组装。利用重组菌株E.coli GPE10进行多片段DNA的组装,是一种简单、快速并且高效的DNA定向克隆技术,不需要进行酶切酶连,可以直接将DNA片段转入E.coli GPE10感受态细胞实现分子克隆,不受酶切位点限制,可将目的DNA片段定向克隆至任意载体的任意位点,是一种不依赖于连接反应的快速克隆技术,可以同时实现多片段DNA的高效顺序拼接。 | ||
搜索关键词: | 基于 重组 载体 pgpe57 菌株 coligpe10 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种重组载体pGPE57,其特征在于,为将pKD46质粒中的bet元件替换成pfu‑Ssod7DNA序列形成全长序列为SEQ ID NO.17的重组质粒pGPE57。
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