[发明专利]一种视网膜色素变性检测T淋巴细胞方法在审
申请号: | 201610724698.0 | 申请日: | 2016-08-26 |
公开(公告)号: | CN107782899A | 公开(公告)日: | 2018-03-09 |
发明(设计)人: | 郭元明 | 申请(专利权)人: | 郭元明 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577;C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 741000 甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 一种视网膜色素变性检测T淋巴细胞方法,外周血T淋巴细胞表面人类白细胞DR抗原(HLADR)的测定,采用外周静脉血3mL以肝素抗凝,加Hanks液对倍稀释,经FicollHypaque密度梯度离心20min,取外周血单核细胞(PBMC)层经Hanks液洗2遍,加PRMI‑1640洗1遍,用RPMI‑1640完全培养基(内含10mol/LHgpesbuffer,青霉素100 U/mL)调细胞浓度至5×106/mL于小试管,取100μL于小试管内加DR单克隆抗体,后置4℃温度下1h洗2次,弃上清液悬浮至20μL,取样滴于载玻片上加盖玻片,置荧光显微镜下观察,计算200个细胞及其中荧光阳性细胞数,计百分率。 | ||
搜索关键词: | 一种 视网膜 色素 变性 检测 淋巴细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种视网膜色素变性检测T淋巴细胞方法,外周血T淋巴细胞表面人类白细胞DR抗原(HLADR)的测定,采用外周静脉血3mL以肝素抗凝,加Hanks液对倍稀释,经FicollHypaque密度梯度离心20min,取外周血单核细胞(PBMC)层经Hanks液洗2遍,加PRMI‑1640洗1遍,用RPMI‑1640完全培养基(内含10mol/L Hgpes buffer,青霉素100 U/mL)调细胞浓度至5×106/mL于小试管,取100μL于小试管内加DR单克隆抗体,后置4℃温度下1h洗2次,弃上清液悬浮至20μL,取样滴于载玻片上加盖玻片,置荧光显微镜下观察,计算200个细胞及其中荧光阳性细胞数,计百分率。
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