[发明专利]半自动样本处理液相色谱技术测定水溶性维生素的方法有效
| 申请号： | 201610781220.1 | 申请日： | 2016-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN106324142B | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 陈大为 | 申请（专利权）人： | 陈大为 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/14 |
| 代理公司： | 济南鼎信专利商标代理事务所(普通合伙) 37245 | 代理人： | 彭成 |
| 地址： | 250033 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用半自动样本处理液相色谱技术同时测定血清中多种水溶性维生素的方法，采用HPLC方法，色谱条件为：流动相A：磷酸二氢钾溶液，流动相B：甲醇，梯度洗脱；所述多种水溶性维生素选自维生素B1、B2、B6、B9、B12、维生素C、烟酸或烟酰胺。对血清进行前处理：先用甲醇或乙腈沉淀蛋白，离心后取上清液，用半自动固相萃取仪萃取，洗脱液为甲醇水溶液，收集的柱后溶液进行氮气吹干至合适体积。本发明采用高效液相色谱法检测血清中多种水溶性维生素，可以实现定性与定量检测，特异性强，灵敏性高，通量高，操作简单，成本低，结果客观易于分析，尤其适合临床普及应用。 | ||
| 搜索关键词： | 水溶性维生素 血清 样本处理液 色谱技术 流动相 甲醇 高效液相色谱法检测 磷酸二氢钾溶液 固相萃取仪 甲醇水溶液 沉淀蛋白 氮气吹干 定量检测 结果客观 取上清液 色谱条件 特异性强 梯度洗脱 维生素C 灵敏性 前处理 洗脱液 烟酰胺 通量 烟酸 乙腈 萃取 维生素 定性 应用 分析 | ||
【主权项】：
1.一种利用半自动样本处理液相色谱技术同时测定血清中多种水溶性维生素的方法，其特征在于：采用HPLC方法；所述水溶性维生素为维生素B1、B2、B6、B9、B12、维生素C、烟酸和烟酰胺；所述血清进行以下前处理：先用甲醇或乙腈沉淀蛋白，离心后取上清液，用半自动固相萃取仪萃取，洗脱液为：甲醇水溶液，收集的柱后溶液进行氮气吹干至合适体积，然后进样分析；色谱条件为：柱温：30℃；色谱柱:Waters XBridge C18 3.5um 4.6*250mm；进样体积：20uL；流动相A：磷酸二氢钾溶液，流动相B：甲醇；梯度洗脱条件为：0‑5min A:B＝90:10，5‑7min过渡B为50％，7‑12min A：B＝50:50,12‑14min过渡B为30％，14‑18min A：B＝70:30，18‑22min过渡B为10％，流速：0.9mL/min；波长为260nm。
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