[发明专利]基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法

摘要

本发明涉及一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，包括以下步骤(1)配制芽诱导培养基、不定芽增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基，(2)多刺老鼠簕的组织培养。与现有技术相比，本发明通过组织培养技术，年繁殖系数提高到140000，成本减低0.6‑0.8元/株，多刺老鼠簕组培苗极大提高繁殖速度和苗的整齐度,更好地保持原有的母本性状。

主权项

一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、芽诱导培养基：MS+BA 1‑3mg/L+NAA 0.1‑0.3mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6‑BA 0.5‑1.5mg/L+NAA 0.05‑0.15mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6‑BA 0.1‑1mg/L+NAA 0.05‑0.15mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA 0.1‑0.3mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25±1℃，光照为1700‑1900Lx；(2)多刺老鼠簕的组织培养：2.1、无菌材料的获得多刺老鼠簕在春季3‑4月挖取地上部分的小芽，用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5‑6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长，接种于芽诱导培养基上；2.2、芽的分化和增殖小芽接种于诱导培养基上30天后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；2.3、不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2‑3小芽可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2‑3cm；2.4、生根培养取1‑2cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至1‑2cm；2.5、炼苗与移栽生根培养28‑32天后，根系长至1‑2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化炼苗40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为90％以上。