[发明专利]独蒜兰组织培养一步成苗培养方法

摘要

本发明公开了一种独蒜兰组织培养一步成苗培养方法。本发明充分利用独蒜兰蒴果种子数量大的优势，以种子为外植体建立适合独蒜兰一步成苗的组培快繁技术，本发明通过MSN培养基大大缩短了组培时间，并且可以有效解决组培苗黄化、生根困难、茎叶徒长的问题，大大降低了生产成本，提高了繁殖的成活率，是值得推广的技术。

主权项

1.一种独蒜兰组织培养一步成苗培养方法，其特征在于：包括如下步骤：1）优良种子的获得：选择芽眼饱满、个头大、无病害的独蒜兰假鳞茎，于当年11月‑翌年2月栽种，3月～4月开花后进行独蒜兰人工授粉；2）蒴果的采收与选择：授粉后190‑210天，挑选饱满的黄色蒴果，适时采收；3）无菌播种：蒴果采收后，先用水冲洗干净硕果表面，然后用酒精擦拭蒴果表面消毒处理，在无菌条件下，将种子均匀地播种到播种培养基表面，播种瓶放在培养室中培养3周后种子开始萌发成绿色原球茎，2个月后长成带叶的幼苗；步骤3）中所述的播种培养基是以B5培养基为基础，包含0.5mg/L NAA、20 g/L 蔗糖、6.5g/L琼脂及0.5 g/L活性炭，pH值为5.8，培养基分装后在121℃灭菌25分钟备用；播种好的培养瓶在培养室培养的条件是：温度为 22±1℃，光照时间12h/d，光照强度1800‑2000 lx；4）幼苗转接：将带叶幼苗转接到MSN培养基上，每瓶转接15株；转接后的幼苗及时放在培养室中培养，生长3‑4个月后形成球茎直径0.7‑0.9cm的幼苗，即可出瓶移栽；步骤4）中所述的MSN培养基包括硝酸钾 KNO3：850‑1050mg/L，硝酸铵 NH4NO3：300‑450 mg/L；磷酸二氢钾 KH2PO4：112‑212 mg/L；硫酸镁 MgSO4.7H2O：150‑230mg/L；氯化钙 CaCl2：180‑260mg/L；微量元素、有机物和铁盐的组成成分和MS相同，但是浓度减半；NAA的浓度为1.0‑1.2mg/L；蔗糖的浓度为20‑30g/L；琼脂的浓度为6‑7g/L；活性炭的浓度为0.5‑1.5g/L；土豆汁的浓度为50‑150g/L。