[发明专利]一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法

摘要

本发明公开了一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法，它涉及生物技术领域；先对辽刺参低聚肽分子量进行检测；实验分组及灌胃剂量选择：选择昆明种小鼠240只，雄性，体重20±2g，随机分为8组，每组30只，10只用于小鼠负重游泳，10只用于测定血清尿素氮，10只用于测定肝糖原，负重游泳实验；血清尿素氮测定：肝糖原的测定：末次灌胃30min后，采用断颈法将小鼠处死，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，测定；对辽刺参进行酶解等精深加工后，获得分子量小于1000Da的低聚肽。对辽刺参低聚肽和大豆低聚肽及辽刺参粉的抗疲劳程度进行比较，为其进入市场提供科学依据，为海洋新药物资源的开发、利用和推广奠定基础。

主权项

1.一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法，其特征在于：所述的研究方法具体步骤如下：(1)先对辽刺参低聚肽分子量进行检测：将样品送江南大学分析测试中心依据GB/T22729-2008采用高效凝胶过滤色谱法分析肽段分子量；(2)实验分组及灌胃剂量选择：选择昆明种小鼠240只，雄性，体重20±2g，随机分为8组，每组30只，每组小鼠做如下处理：10只用于小鼠负重游泳，10只用于测定血清尿素氮，10只用于测定肝糖原，将8组小鼠进行以下试验分组，分别为阴性对照组；辽刺参低聚肽高剂量组；辽刺参低聚肽中剂量组；辽刺参低聚肽低剂量组；大豆低聚肽中剂量组；大豆低聚肽低剂量组；辽刺参粉高剂量组；辽刺参粉低剂量组；采用人体推荐用量的20倍、10倍和5倍分别作为高、中、低剂量组的灌胃剂量，依次为0.5g/kg、0.17g/kg、0.085g/kg，其中阴性对照组灌胃蒸馏水，各组小鼠每日灌胃1次，连续灌胃30d；(3)负重游泳实验：末次灌胃30min后，在小鼠尾部负7％体重的铅皮，放入水温25℃的游泳箱，游泳箱尺寸为100cm×100cm×80cm，水深不低于30cm，用秒表记录小鼠自游泳开始至溺亡的时间；(4)血清尿素氮的测定：末次灌胃30min后，将小鼠置于温度为30℃的游泳箱中不负重游泳90min，休息60min将小鼠拔眼球采全血约0.5mL，血中不加抗凝剂，放置到4℃的冰箱中保存约3h，待血凝固后于离心机中在2000r/min下离心15min，取血清测定血尿素氮含量；(5)肝糖原的测定：末次灌胃30min后，采用断颈法将小鼠处死，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，测定其肝糖原含量。