[发明专利]一种DNA序列编辑的方法有效
| 申请号： | 201611022023.8 | 申请日： | 2016-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN108085328B | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 王金;赵国屏;张宏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/65 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 陈详;陆凤 |
| 地址： | 200032 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种DNA序列编辑的方法，具体地本发明的方法采用两步替换法来进行DNA序列编辑，其中第一步为替换目标位点附近的一段序列(或为插入一段外源的DNA序列)，第二步将替换(或插入)的外源DNA序列切开，筛选外源DNA重组片段与基因组进行DNA重组之后得到的细胞，从而上述目标位点附近的序列替换为目标序列。结合CRISPR技术或其它技术，本发明可以高效、快速地进行染色体任意位点，并且可以进行任何形式的突变(包括突变、删除、插入外源DNA序列)等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 序列 编辑 方法 | ||
【主权项】：
1.一种DNA序列编辑方法，其特征在于，所述方法包括步骤：提供第一DNA重组片段，所述第一DNA重组片段具有第一筛选标记，和供酶切割的切割位点，通过同源重组将所述第一DNA重组片段整合入所述DNA序列待编辑位点的一侧；提供第二DNA重组片段，所述第二DNA重组片段具有与所述第一DNA重组片段中的所述切割位点两侧序列同源的同源臂；酶切割整合入所述DNA序列的所述第一DNA重组片段，在所述切割位点形成切口，通过同源重组将所述第二DNA重组片段整合入待编辑DNA序列中，从而实现所述DNA序列编辑。
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