[发明专利]果蔬高效拮抗菌素保鲜剂及制备方法

摘要

本发明涉及一种果蔬高效防拮抗菌素防霉保鲜剂及其制备方法，步骤如下⑴由苏云金芽孢杆菌CICC 23702产生几丁质酶⑵角质酶、纤维素酶由从葡萄中分离的灰霉诱导产生；⑵由从葡萄中分离的灰霉诱导产生角质酶、纤维素酶；⑶防霉保鲜剂配方100份无菌水中加入海藻糖1‑3份、甘油4‑5份、环氧大豆油3‑4份和壳聚糖0.2‑0.4份，5‑10份的几丁质酶、5‑8份的角质酶、8‑10份的纤维素酶；⑷使用前抗菌酶复性。本发明的保鲜剂生产后形成干燥的粉末，非常容易保藏，常温保存即可，不需要特殊条件，使用时直接喷洒至葡萄表面，延长果蔬尤其是葡萄的保存期限。

主权项

一种果蔬高生防拮抗菌素防霉保鲜剂的制备方法，其特征在于：具体成分如下：⑴由苏云金芽孢杆菌CICC 23702产生几丁质酶：采用磁化水代替蒸馏水制备培养基，培养基中加0.8～1.0％的Mg2+、0.3％～0.5％的Mn2+以及0.2～0.3wt％的几丁质配成高产几丁质酶的诱导培养液；在红光条件下，加入30～40mL的增殖诱导培养基培养4d，复合诱导苏云金芽孢杆菌高产几丁质酶，培养液采用超声频率为15KHz‑20KHz的超声波进行细胞破碎并纯化以敲除几丁质酶杂基，然后5000r/min低温离心20min后收集上清液，调节pH5.5～5.8至该几丁质酶等电点，沉淀提取分离；⑵由从葡萄中分离的灰霉诱导产生角质酶、纤维素酶诱导条件：将108spore/mL灰霉菌孢子加5mL霉菌增殖培养基中，其中培养基中加入0.8％～1.2％的角质酶和2.0％～2.5％的纤维素酶以诱导霉菌高产角质酶和纤维素酶，28℃培养4d后，5000r/min冷冻低温离心10min～20min，以除去菌体和培养基残渣，取上清液调节上清液pH6.2‑6.9至两酶等电点，沉淀提取生物活性物质角质酶和纤维素酶；⑶防霉保鲜剂配方：重量份数100份无菌水中加入海藻糖1～3份、甘油4～5份、环氧大豆油3～4份和壳聚糖0.2～0.4份，并500～600r/min搅拌1‑1.5小时，使其完全溶解，5～10份的几丁质酶、5～8份的角质酶、8～10份的纤维素酶，500～600r/min搅拌20～30分钟混匀，所制备拮抗菌素防霉剂置于0℃～4℃条件下保存；⑷保鲜剂使用前首先进行抗菌酶复性复性加入复性剂，复性剂为：将0.5～0.6份Mg2+、0.3～0.5份的Mn2+，并用10份的0.1mol/L磷酸缓冲液，混匀，调节pH 7.2～7.9。