[发明专利]一种小鼠小肠巨噬细胞分离及培养方法在审
| 申请号： | 201611032935.3 | 申请日： | 2016-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN108070557A | 公开（公告）日： | 2018-05-25 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214434 江苏省江阴市东盛*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种小鼠小肠巨噬细胞分离及培养方法，包括步骤：(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死小鼠，酒精消毒后迅速取出小肠，预冷PBS冲洗肠腔至流出液变清；(b)小肠纵向剖开，加入EDTA震荡温育；(c)静置弃上清，加入混合酶液消化；(d)连续筛网过滤；(e)滤液经Ficoll分离，清洗2‑3次；(f)完全混合培养基重悬细胞沉淀，接种于培养瓶中；(g)差速贴壁法获得小肠巨噬细胞。本发明提供了一种简单、高效、稳定的分离高活性、高纯度的小肠巨噬细胞的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 小肠 巨噬细胞 小鼠 差速贴壁法 混合培养基 戊巴比妥钠 腹腔注射 混合酶液 酒精消毒 筛网过滤 细胞沉淀 纵向剖开 高纯度 高活性 流出液 培养瓶 肠腔 温育 预冷 重悬 接种 震荡 清洗 取出 消化 | ||
【主权项】：
1.一种小鼠小肠巨噬细胞分离及培养方法，包括步骤：(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死小鼠，酒精消毒后迅速取出小肠，预冷PBS冲洗肠腔至流出液变清；(b)小肠纵向剖开，加入EDTA震荡温育；(c)静置弃上清，加入混合酶液消化；(d)连续筛网过滤；(e)滤液经Ficoll分离，清洗2-3次；(f)完全混合培养基重悬细胞沉淀，接种于培养瓶中；(g)差速贴壁法获得小肠巨噬细胞。
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