[发明专利]一种引入多胺标签的基因改造方法,脂肪酶的可溶表达及生物仿生固定化方法有效
申请号: | 201611111344.5 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN107779461B | 公开(公告)日: | 2021-06-01 |
发明(设计)人: | 郑良玉;周小雪;张锁秦;田雪梅 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C07K19/00;C12N15/70;C12N11/14 |
代理公司: | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 刘锋;郑丹 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明提供了一种实现其可溶、有活性表达的基因改造方法:以N末端和C末端同时带有多胺标签的脂肪酶基因作为目的基因,在脂肪酶亲本基因序列的N末端添加编码m个组氨酸、m个精氨酸或m个赖氨酸的核苷酸序列,m=2~10,同时在脂肪酶亲本基因序列的C末端添加编码n个组氨酸、n个精氨酸或n个赖氨酸的核苷酸序列,n=2~10,并针对目的基因设计引物;通过PCR获得N末端和C末端同时带有多胺标签的脂肪酶基因。该基因表达后产出可溶的带有多胺标签的脂肪酶,其可以诱导仿生纳米硅的形成及固定化。本发明在温和的条件下、短时间就可获得高活力和固定化效率的固定化酶;操作简便,固定化条件易控制、成本低。 | ||
搜索关键词: | 一种 引入 标签 基因 改造 方法 脂肪酶 可溶 表达 生物 仿生 固定 | ||
【主权项】:
一种实现其可溶、有活性表达的基因改造方法,其包括如下步骤:以N末端和C末端同时带有多胺标签的脂肪酶基因作为目的基因,在脂肪酶亲本基因序列的N末端添加编码m个组氨酸、m个精氨酸或m个赖氨酸的核苷酸序列,m=2~10,同时在脂肪酶亲本基因序列的C末端添加编码n个组氨酸、n个精氨酸或n个赖氨酸的核苷酸序列,n=2~10,并针对目的基因设计引物;通过PCR获得N末端和C末端同时带有多胺标签的脂肪酶基因。
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