[发明专利]一种基因同源重组修复报告系统及建立方法

摘要

本发明公开一种基因同源重组修复报告系统及建立方法，系统包括报告细胞系和基因同源重组修复模板AAV，报告细胞系为整合有GFP(510_513delAAC)基因的单克隆HEK‑293或HT‑1080‑GFP(510_513delAAC)细胞系，GFP(510_513delAAC)基因的序列如SEQ ID NO.1；基因同源重组修复模板AAV为腺相关病毒包装的同源重组修复模板质粒pA2‑GFP‑pMC1TK，pA2‑GFP‑pMC1TK包含不含启动子的GFP和Puro基因。建立方法为包括报告细胞系的建立和基因同源重组修复模板AAV的建立。通过采用基因同源重组修复模板AAV感染报告细胞系的细胞后，用流式细胞术检测基因修复后恢复绿色荧光细胞的比率，以此来评估基因同源重组修复的效率。利用此系统可以在体外快速、有效、高通量筛选靶向HRR相关的分子，有助于临床肿瘤治疗靶标的筛选，药物开发，HRR机制进行深入研究。

主权项

一种基因同源重组修复报告系统，其特征在于，包括报告细胞系和基因同源重组修复模板AAV，报告细胞系为整合有GFP(510_513delAAC)基因的单克隆HEK‑293或HT‑1080‑GFP(510_513delAAC)细胞系，GFP(510_513delAAC)基因的序列如SEQ ID NO.1；基因同源重组修复模板AAV为腺相关病毒包装的同源重组修复模板质粒pA2‑GFP‑pMC1TK，pA2‑GFP‑pMC1TK包含不含启动子的GFP和Puro基因。