[发明专利]一种同序双扩增的数字定量PCR方法有效
申请号: | 201611243465.5 | 申请日: | 2016-12-28 |
公开(公告)号: | CN106834441B | 公开(公告)日: | 2020-02-28 |
发明(设计)人: | 江洪;曲越;曲超琪 | 申请(专利权)人: | 澳門帝傑數碼基因有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6848 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 俞梁清 |
地址: | 中国澳门提督*** | 国省代码: | 澳门;82 |
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摘要: |
本发明公开了一种同序双扩增的数字定量PCR方法,该方法是一种倍比稀释样本定量PCR方法,其特征是先用3’端缩短3‑6b碱基的短靶引物预先扩增10‑15个循环而预放大10 |
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搜索关键词: | 一种 扩增 数字 定量 pcr 方法 | ||
【主权项】:
一种同序双扩增的数字定量PCR方法,其特征在于,为倍比稀释样本的双扩增定量PCR,包括以下步骤:先用3’末端缩短3‑6b碱基的短靶引物于小体积PCR反应液预扩增10‑15个循环,接着用末端不缩短的中部同序靶引物PCR液于同管内稀释预扩液10‑20倍大体积荧光PCR 30‑35个循环,矿物油密闭条件下无热盖扩增,总反应大于40个循环的同序双扩PCR确保≥“1”分子有效检出和无模板“0”无非特异性反应,根据样本稀释倍数、体积推算靶分子定量。
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