[发明专利]一种可溶性水通道蛋白AqpZ融合载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种可溶性水通道蛋白AqpZ融合载体及其构建方法。本发明利用除去信号肽的麦芽糖结合蛋白ΔMBP作为N端亲水性标签，利用截短的人类载脂蛋白ApoAI*作为C端两亲性标签，利用C端His作为纯化和检测标签，构建pET28a‑ΔMBP‑AqpZ‑ApoAI*‑His重组载体。本发明实现了原为脂溶性的水通道蛋白的水溶化，在不需要借助去污剂的条件下，将其溶解在水相中，同时显著提高了水通道蛋白的表达量，适用于工业化生产。

主权项

1.一种可溶性水通道蛋白AqpZ融合载体，其特征在于，所述的融合载体为利用PCR扩增pMBP‑p质粒，得到除去N端信号肽的麦芽糖结合蛋白cDNA即ΔMBP，将ΔMBP整合到pET28a质粒中得到pET28a‑ΔMBP载体；PCR扩增pET28a‑ApoAI质粒，得到截短的人类载脂蛋白cDNA即ApoAI*，将ApoAI*整合到pET28a‑ΔMBP载体中得到pET28a‑ΔMBP‑ApoAI*‑His载体；PCR扩增大肠杆菌基因组DNA，得到水通道蛋白AqpZ的cDNA即AqpZ，将AqpZ整合到pET28a‑ΔMBP‑ApoAI*‑His载体中得到pET28a‑ΔMBP‑AqpZ‑ApoAI*‑His载体。