[发明专利]一种原代小鼠肝实质细胞的冻存方法在审
申请号: | 201611253844.2 | 申请日: | 2016-12-30 |
公开(公告)号: | CN108260586A | 公开(公告)日: | 2018-07-10 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214434 江苏省无锡市江阴市东*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种小鼠原代肝实质细胞的冻存方法,包括以下步骤:1)小鼠肝实质细胞冻存液的配制;(2)两步灌流法分离小鼠肝实质细胞;(3)冻存液重悬小鼠肝实质细胞后加入冻存管中;(4)采用逐级降温法冻存小鼠肝实质细胞(5)小鼠肝实质细胞的复苏;(6)TB拒染法测定小鼠肝实质细胞成活率;(7)酶指标活性测定;(8)小鼠肝实质细胞形态观察;(9)ELISA法检测;(10)RT‑PCR检测。本发明提供的一种小鼠原代肝实质细胞的冻存方法,操作简单,冻存复苏后所得细胞数量多,成活率高,是一种理想的小鼠原代肝实质细胞的冻存方法,为实验提供可靠的细胞资源。 | ||
搜索关键词: | 实质细胞 小鼠肝 冻存 肝实质细胞 小鼠 冻存液 成活率 复苏 细胞 分离小鼠 活性测定 形态观察 逐级降温 冻存管 灌流 重悬 配制 检测 | ||
【主权项】:
1.一种小鼠原代肝实质细胞的冻存方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)小鼠原代肝实质细胞冻存液的配制;(2)两步灌流法分离小鼠肝实质细胞;(3)冻存液重悬小鼠肝实质细胞后加入冻存管中;(4)采用逐级降温法冻存小鼠肝实质细胞(5)小鼠肝实质细胞的复苏;(6)TB拒染法测定小鼠肝实质细胞成活率;(7)酶指标活性测定;(8)小鼠肝实质细胞形态观察;(9)ELISA法检测;(10)RT‑PCR检测。
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