[发明专利]一种从多种混合DNA中超灵敏检测痕量DNA的方法和试剂有效
| 申请号： | 201611260467.5 | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN106755443B | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 王永利;宋卓;袁梦兮 | 申请（专利权）人： | 人和未来生物科技（长沙）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 孙银行;彭家恩 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市高新*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从多种混合DNA中超灵敏检测痕量DNA的方法和试剂，所述方法包括：(a)使用探针对含有待检测位点或待检测区域的目标DNA的接头连接产物进行探针预富集，其中所述探针是双链寡核苷酸，所述接头连接产物的两端的接头均包括通用引物的结合位点；(b)使用针对所述待检测位点或待检测区域的上游特异性引物和下游特异性引物，以及两端的通用引物对探针预富集产物进行特异性富集，再对特异性富集产物进行通用引物扩增。本方法解决了现有检测技术针对含有大量外源DNA污染的复杂样本检测灵敏度低的技术问题。 | ||
| 搜索关键词： | 探针 超灵敏检测 待检测区域 特异性富集 特异性引物 接头连接 通用引物 痕量DNA 混合DNA 预富集 位点 双链寡核苷酸 检测灵敏度 通用引物对 复杂样本 检测技术 结合位点 目标DNA 外源DNA 检测 扩增 上游 污染 | ||
【主权项】：
1.一种从多种混合DNA中超灵敏检测痕量DNA的方法，其特征在于，所述方法包括：（a）使用探针对含有待检测位点或待检测区域的目标DNA的接头连接产物进行探针预富集，其中所述探针是通过PCR扩增得到的一对或多对覆盖待检测位点或待检测区域的双链寡核苷酸，所述接头连接产物的两端的接头均包括通用引物的结合位点；（b）使用针对所述待检测位点或待检测区域的上游特异性引物和下游特异性引物，以及两端的通用引物对探针预富集产物进行特异性富集，再对特异性富集产物进行通用引物扩增；以及（c）对所述步骤（b）的扩增产物进行测序，以检测所述待检测位点或待检测区域。
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