[发明专利]鉴定并验证亲和试剂的方法

摘要

本发明特征在于鉴定并验证亲和试剂如抗体的方法。本发明的方法主要涉及通过例如细菌（例如大肠杆菌（E.coli））上的噬菌体展示来筛选抗体文库，从而鉴定能够结合期望靶多肽的特定抗体克隆。以此方式鉴定的克隆可随后利用酵母双杂交进行验证。在一些情况下，通过它们结合半抗原的能力鉴定的抗体可通过它们结合全长抗原的能力进行验证。验证过的克隆可通过另外几轮噬菌体展示和/或酵母双杂交进一步进行筛选。在每轮之间，可产生并筛选特定抗体克隆的另外的变体以鉴定表现出对所关注的靶具有更高结合亲和力的变体。

主权项

一种鉴定并验证结合部分能够结合靶多肽的方法，所述方法包括：(a)提供多种病毒，每种病毒包括：编码结合部分的核酸，其中所述结合部分展示在所述病毒表面；(b)与所述靶多肽或其肽片段一起温育所述多种所述病毒；(c)检查所述病毒展示的所述结合部分是否结合所述靶多肽或其所述肽片段；(d)对于每个鉴定为能够结合所述靶多肽的所述结合部分，在细胞中表达：（i）第一融合蛋白，其包括鉴定为能够结合所述靶多肽的特定结合部分和第一报告部分，以及（ii）第二融合蛋白，其包括所述靶多肽或其肽片段，以及第二报告部分，其中所述特定结合部分与所述靶多肽或其所述肽片段的结合导致所述细胞中可检测基因的表达，其中所述可检测基因的表达处于所述第一报告部分和所述第二报告部分的控制之下；并且（e）测定是否每个所述细胞表达所述可检测基因，从而验证鉴定为能够结合所述靶多肽的所述结合部分能够与所述靶多肽结合。